مقاله اثر تراتوژنیک و سمیت کاربوکسین بر مورفولوژی و سلولهای کبدی جنین جوجه دارای 7 صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است
فایل ورد مقاله اثر تراتوژنیک و سمیت کاربوکسین بر مورفولوژی و سلولهای کبدی جنین جوجه کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.
این پروژه توسط مرکز مرکز پروژه های دانشجویی آماده و تنظیم شده است
توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله اثر تراتوژنیک و سمیت کاربوکسین بر مورفولوژی و سلولهای کبدی جنین جوجه،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد
بخشی از متن مقاله اثر تراتوژنیک و سمیت کاربوکسین بر مورفولوژی و سلولهای کبدی جنین جوجه :
مقدمه
آفت کشها نقشی مهمی در کشاورزی مدرن و تولید غذا (در میتوکندری قارچها) مهار میکند .(20) سوکسینات
دارند. با این وجود مصرف بی رویه آنها منجر به آلودگی دهیدروژناز یک آنزیم کلیدی در چرخه کربس و زنجیره
محیط زیست شده است 4)و.(6 کاربوکسین 2)و3 دی انتقال الکترون میباشد. مطالعات مولکولی ساختاری نشان
هیدرو–5کاربوکسانیلیدو–6متیل 1و4 –اگزاتین، داده که کاربوکسین از محل اتصال یوبی کویتین به آنزیم
ویتاواکس) یکی از چند ترکیب قارچ کش شیمیایی است سوکسینات دهیدروژناز متصل شده و فعالیتهای اصلی
که برای کنترل قارچهای بیماریزای گیاهان زراعی از آن میتوکندری را سرکوب میکند 9) و .(17 در مورد اثر سمی
استفاده می شود. قدرت قارچ کشی ترکیبات اگزاتیین در کاربوکسین بر سلولها و جنین، اطلاعات بسیار محدودی در
سال 1966 نشان داد که کاربوکسین در موجودات مختلف دسترس است. مطالعات نشان داده که این ترکیب با مهار
مکانیسم تأثیر متفاوتی دارد. رشد مخمر ها را از طریق سنتز پروتئین از رشد مخمر جلوگیری میکند (8) از سوی
سرکوب سنتز پروتئینها (8) و مهار اکسیداسیون سوکسینات دیگر یک ترکیب فعال نوری است که در اثر تابش نور
298
مجله پژوهشهای جانوری (مجله زیست شناسی ایران) جلد 26، شماره 3، 1392
خورشید بر محلول آبی آن، تولید سولفوکسید و برخی ترکیبات دیگر میکند که تأثیرات سمی آنها بر دافنی، روتیفر و تعدادی از سخت پوستان مورد بررسی قرار گرفته است .(5) از سوی دیگر، جنین جوجه مدل مفیدی برای مطالعه تأثیر سموم وداروها بر تکوین جنینی است. به راحتی قابل دسترس و دارای هزینه بسیار پایین بوده و جانشین خوبی برای تعمیم در پستانداران محسوب میشود(.(13 در این تحقیق تأثیر تراتوژنیک سم کاربوکسین بر جنین جوجه بررسی و میزان مقاومت سلولهای کبدی نسبت به آن در شرایط آزمایشگاهی مورد مطالعه قرار گرفته است.
مواد و روشها
تیمار جنین جوجه : تخم مرغهای بارور نژاد راس (Ross)
از شرکت آرتا جوجه خریداری و در دمای 10±1 درجه سانتی گراد و رطوبت نسبی 65±5 درصد نگهداری شدند.
ترکیب قارچ کش کاربوکسین 5) و 6 دی هیدرو–2 متیل
1- و -4 اگزاتین -3- کاربوکسانیلید) با درجه خلوص 98
درصد از شرکت گیاه تهران تهیه گردید. 50 میکرولیتر سم محلول در استون و با غلظتهای 20، 100، 200 و400
میکروگرم / تخم مرغ ، در روز صفر انکوباسیون و در شرایط استریل با استفاده از سرنگ هامیلتون از قسمت کیسه هوا به کیسه زرده تخم مرغها (n= 7) تزریق شد.
بلافاصله محل تزریق توسط پارافین مذاب بسته و سپس تخم مرغها در دمای 37/7 – 38 درجه سانتی گراد و رطوبت نسبی 65 درصد در انکوباتور نگهداری شدند. به گروه شم 50 (n= 7) میکرولیتر استون (حلال) تزریق گردید. در هر تکرار یک گروه از تخم مرغها به عنوان کنترل همزمان با گروه تیمار و شم گرماگذاری گردید.
جهت کنترل رشد جنینی در طول انکوباسیون، به طور متوسط 4 بار کندلینگ انجام گرفت. این آزمایشها در چهار تکرار اجرا شد.
بررسی سمیت و خصوصیات تراتوژنیک کاربوکسین:
تخم مرغهای تیمار شده و شم، در روز 19 انکوباسیون باز و توزین شدند. میزان مرگ و میر آنها ثبت و با فرمول زیر درصد تلفات محاسبه گردید و ناهنجاریهای ظاهری قابل تشخیص بررسی و ثبت گردید(.(3
)] ×100در صد تلفات شم-)/(100 در صد تلفات شم- در صد تلفات تیمار)= [ در صد تلفات
برای بررسی ناهنجاری اسکلتی، پوست جنین جدا و محتویات شکمی تخلیه گردید و به مدت 3 روز در محلول هیدرواکسید پتاسیم 2) درصد) قرار گرفت. سپس، جنینها در محلول هیدرواکسید پتاسیم 1) درصد) حاوی الایزارین 0/1) درصد) به مدت3 روز رنگ آمیزی گردید.
شفافسازی نهایی با قراردادن جنین در گلیسرول انجام شد
2)و.(4
بررسی سمیت سلولی کاربوکسین بر سلولهای کبدی
جنین: برای بررسی اثرات سایتوتوکسیسیتی، کبد جنین 12
روزه جوجه استخراج و پس از تیمار با آنزیم تریپسین در محیط کشت RPMI (در پلیتهای 24 خانه) قرار گرفت.
پس از 24 ساعت، سلولها در فاز رشد با غلظتهای 5 ،10، 25، 50 و 100 میکروگرم/میلی لیتر برای 16 ساعت تیمار و درصد سلولهای زنده به وسیله آزمون سنجش احیای فورامازون بررسی شدند .(18) در سلولهایی که از لحاظ متابولیکی فعال هستند، ترکیب MTT در حضور سوکسینات دهیدروژناز میتوکندریای احیاء شده به شکل کریستال نا محلول فورامازون در میآید که شدت تولید کریستال نشان دهنده حیات سلول میباشد. بدین منظور، محیط کشت سلولهای تیمار شده خارج و محیط کشت تازه حاوی 10 در صد محلول MTT (محلول 5 میلیگرم در میلیلیتر در بافر فسفات 0/1 مولار با (pH: 7/4 به چاهکها اضافه شد. به مدت 3 ساعت در 37 درجه سانتی گراد و در شرایط تاریکی گرماگذاری گردید. کریستالهای ایجاد شده در DMSO حل و جذب آنها در طول موج 570
299
مجله پژوهشهای جانوری (مجله زیست شناسی ایران) جلد 26، شماره 3، 1392
نانومتر ثبت گردید. مقدار IC50 به عنوان غلظتی از سم در اختلاف میانگین وزن بین نمونههای تیمار شده و شم نشان
نظر گرفته شد که باعث 50 درصد کاهش در جذب نوری داد که اختلاف قابل ملاحظه ای حتی در بالاترین غلظت
میگردد و میزان درصد سلولهای زنده از رابطه در بین تیمارها از نظر وزن جنین بروز نمیکند.
“شم/ODتیمار”OD محاسبه گردید(.(19
نتایج
تزریق غلظتهای مختلف سم کاربوکسین با حجم ثابت
نشان داد که با افزایش غلظت از 20 تا 400 میکروگرم /
تخم مرغ در روز صفر انکوباسیون (در داخل زرده) افزایش
قابل توجهی در مرگ و میر دیده میشود، به طوری که در
غلظتهای 400، 200، 100 و20 میکروگرم به ترتیب 33/6،
38/9، 56 و61 درصد از جنینها زنده ماندند. به عبارت شکل -1 مقایسه درصد بقاء جنین جوجه تیمار شده با غلظتهای
دیگر افزایش غلظت سم باعث افزایش مرگ و میر گردید.
مختلف کاربوکسین، با استفاده از اختلاف بین درصد بقاء گروه شم با
اختلاف کسر بقاء بین گروه شم و هر یک از غلظتهای به
گروههای تیمار معنیدار میباشد و میزان بقاء جنین وابسته به غلظت
کار رفته در سطح 5 درصد معنی دار بود. اما تعقیب
سم میباشد. (در هر ستون حروف مشترک، نشان دهنده معنی دار
اختلاف بین غلظتهای مختلف نشان داد که این اختلاف در نبودن نتایج بین گروهها است. P005، .(mean±SE
سطح 5 درصد معنی دار نمی باشد (شکل .(1 بررسی
الف ب
شکل -2 ناهنجاری از نوع پا چنبری در جنین جوجه 19 روزه تیمار شده با 200 میکروگرم / تخم مرغ (ب) و جنین شم (الف
اشتراک‌گذاری:
